Изобретена технология генной инженерии

Генная инженерия представляет собой направление биологической науки, возникшее на стыке генетики, молекулярной биологии, биотехнологии, микробиологии, селекции и медицины. Эта область знания занимается разработкой способов управления генетическим кодом. То есть генная инженерия ищет пути внедрения в клетку новых генов и получения при этом положительного эффекта.

Возможности генной инженерии безграничны. Некогда античные философы любили аллегорически изображать все нереальное и противоестественное в виде мифического козлоконя. В наши дни генетическое конструирование организмов теоретически допускает существование козлоконей и прочих химерических животных — кентавров, сирен, грифонов, базилисков и т. п. Требуется лишь правильное оперирование с наследственным материалом. Однако это не является истинной целью генной инженерии.

На сегодняшний день задача генетического конструирования заключается в выведении штаммов бактерий (дробянок) с запрограммированными свойствами. Хотя задача выглядит весьма скромной, она многое дает для человека. Никакой химик пока не способен состязаться с бактериями в синтезе органических соединений. Как правило, эти соединения не представляют пользы для человека, а иногда и вредны: выделения болезнетворных бактерий токсичны.

Посредством генного конструирования можно заставить дробянок производить те вещества, которые чрезвычайно необходимы человеку. Бактерии размножаются в столь большом количестве, что их продукцию можно получать в колоссальных объемах. Главное — вывести новую разновидность (штамм) бактерий и создать условия для их размножения. В 1980 г. начался промышленный выпуск соматотропина, синтезированного бактериями с измененной генетической конституцией.

Бактерией-производителем выступила хорошо известная ученым кишечная палочка. Прежде соматотропин, необходимый для лечения детской карликовости (нанизма), получали из гипофиза мозга скончавшихся людей. Естественно, препарата катастрофически не хватало. Как, впрочем, не хватало и инсулина, получаемого из печени забитого скота. Потребность в инсулине, используемом при лечении диабета, была удовлетворена лишь на 7 %. Генетики получили штамм кишечной палочки, выделяющий инсулин, и начиная с 1982 г. это вещество производится в промышленных масштабах.

Для того чтобы достичь подобного результата, потребовалось «скрестить» бактерию (!) с человеком, поскольку только в человеческом организме есть гены, ответственные за производство нужной формы соматотропина и инсулина. Эти гены были вырезаны из последовательности человеческой ДНК и внедрены в ДНК бактериальную. Микроорганизм стал синтезировать человеческие гормоны. Сегодня ученые знают уже наверняка, что бактерии в состоянии синтезировать все.

Естественно, наука не собирается останавливаться на достигнутом. Когда изменение генотипа бактерий окажется весьма простым делом, то начнутся работы над сельскохозяйственными растениями и животными. Отдельные изыскания в этой области ведутся уже сейчас. К числу недавних открытий следует отнести обнаружение гена, удваивающего число клубней картофеля, и пр. Генная инженерия позволит выводить принципиально новые сорта культурных растений и породы домашних животных.

Ввести генетический материал в чужую клетку можно несколькими способами. Поколение трансгенных животных получается при внедрении генов в яйцеклетку матери с помощью микроинъекций. Но этот метод применим не всегда.

Ученые имеют дело со столь мелкими объектами, что манипулировать ими посредством любых инструментов невозможно. Вот почему генетики применяют для проведения операций по внедрению отрезков ДНК молекулярные векторы.

В качестве последних выступают вирусы, плазмиды и космиды. В природе постоянно происходит перенос генетической информации от одного организма другому посредством вирусов, которые распространяют инфекцию. Получается, что достаточно заразить подопытные клетки вирусами, несущими нужные гены, как эти гены окажутся внедренными в наследственный материал клеток. Вирусы самой природой устроены таким образом, чтобы внедрять свою ДНК или ее аналог РНК (рибонуклеиновую кислоту) в чужой генетический аппарат.

Впрочем, нельзя сказать, чтобы вирусам отдавалось предпочтение. Выбор вектора зависит от условий эксперимента. Плазмиды не так давно использовались чаще всего. Под плазмидами понимаются особые, кольцевые молекулы ДНК в бактериальных клетках.

В целом методы генной инженерии выглядят следующим образом. На начальной стадии, носящей название рестрикции, идет операция по извлечению нужного гена из человеческой или любой другой ДНК. На молекулу химически воздействуют ферментами, которые отщепляют необходимый отрезок. Ферменты влияют на нуклеиновую кислоту таким образом, что у отрезка остаются «липкие» концы. Это означает, что они легко присоединятся к любой другой молекуле ДНК. Затем следует процедура лигирования. На этой стадии бактериальную плазмиду рассекают ферментами и вклеивают в нее готовый ген-отрезок. Затем плазмиду склеивают веществом лигазой, чтобы она опять приняла кольцевую форму.

Третий этап носит название трансформации. Измененная плазмида (или рекомбинантная) вводится в бактериальную клетку. Это сравнительно нетрудно, поэтому ученые и пользуются плазмидными векторами. Бактерии часто обмениваются между собой генетической информацией с помощью плазмид. Этот процесс заменяет им половое размножение. К сожалению, плазмиды проникают внутрь далеко не всех бактерий. Вирусы более эффективны в этом отношении, поскольку при переносе информации они инфицируют 100 % клеток (бактерий).

Бактерии с измененным генетическим аппаратом называются трансформированными. Они впоследствии размножаются, в результате чего образуется колония генетически одинаковых организмов. Новый генотип оказывается растиражирован. Полученной колонии присваивается название клона. Поскольку клон является конечным продуктом генной инженерии, то само создание и тиражирование трансформированного наследственного материала таким путем носит название клонирования. Завершает процедуру клонирования скрининг — отбор клонов. Из множества трансгенных колоний выбирается одна, отвечающая всем требованиям. Осуществляется такой отбор за счет меток колоний радиоактивным веществом.

Генетическое конструирование включает в себя, помимо создания трансгенных существ, и другие приемы манипуляций над наследственным аппаратом. Среди этих методов числится искусственный мутагенез. Он менее впечатляет, чем операции с применением плазмид, однако весьма эффективен. Искусственный мутагенез сводится к усиленному воздействию на гены в клетках животного или растения активных веществ-мутагенов, ультрафиолета, рентгеновских лучей и прочих факторов, вызывающих изменения генов. Мутагенез протекает под контролем ученых, а потому приводит к возникновению существ с измененной в лучшую сторону наследственностью.